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HIT™ Competent Cells

HIT Competent Cell Store at -70C
PDF file   日本語プロトコール
   
ヒートショック不要の快速コンピテントセル
 HIT™コンピテントセル・シリーズは、画期的な1ステップ形質転換法 「High Ice Transformation」 が適用できる唯一のコンピテントセルです。
 プラスミドDNAと混合した後、1分〜10分間、氷中でインキュベートするだけで高効率の形質転換が行えます。ヒートショックや液体培地による回復処理は必要ありません。

Procedure of HIT Competent Cell 1


 Procedure of HIT Competent Cell 2



  取扱製品
  HIT-DH5a
  HIT-JM109
  HIT-21

  HIT-DH5a


  スタンダードな菌株で快速形質転換!
 用途
組み換えプラスミドの Blue/whiteスクリーニングが可能。プラスミドやλベクターを用いた通常のクローニングに適しています。
 遺伝子型
F- endA1 hsdR17(rk-,mk-) supE44 thi-1 λ- recA1 gyrA96 relA1 Δ(argF-lacZYA)U169 ψ80d lacZ ΔM15
 性能(形質転換効率)
Value 108 HIT-DH5a :
 > 5×107cfu/μg pUC19 (平均 1×108cfu/μg pUC19)
 サブクローニングや通常のクローニングにお薦めです。

High 108 HIT-DH5a :
 > 1×108cfu/μg pUC19 (平均 5×108cfu/μg pUC19)
 高効率が要求されるクローニング、転写産物量の少ない遺伝子のクローニング、一般的なクローニング、遺伝子ライブラリー構築に適しています。

Super 109 HIT-DH5a :
 > 5×108cfu/μg pUC19 (平均 2×109cfu/μg pUC19)
 非常に高い形質転換効率が要求されるクローニング、転写産物量の少ないクローニング、遺伝子ライブラリーの構築が余裕を持ってできます。
 包装
 (品番)    (品名) (内容)(税抜価格)
 RH617Value 108 HIT-DH5a10本×100μl  16,000円
 RH617/3Value 108 HIT-DH5a ×330本×100μl  28,000円
 RH617-J80Value 108 HIT-DH5a J8080本×100μl  48,000円
 RH618High 108 HIT-DH5a10本×100μl  24,000円
 RH618/3High 108 HIT-DH5a ×330本×100μl  48,000円
 RH618-J80High 108 HIT-DH5a J8080本×100μl  68,000円
 RH619Super 109 HIT-DH5a10本×100μl  48,000円
 RH619/3Super 109 HIT-DH5a ×330本×100μl  96,000円
 RH619-J80Super 109 HIT-DH5a J8080本×100μl 150,000円


  HIT-JM109


  午前9時に撒いて、午後5時にピックアップ!!
 用途
組み換えプラスミドの Blue/whiteスクリーニングが可能。プラスミドやλベクターを用いた通常のクローニングに適しています。
菌株の増殖が速いため、朝、HIT™形質転換をすれば、夕方にはコロニーが回収できます。
 遺伝子型
F' traD36 proA+ proB+ lacIq Δ(lacZ)M15 Δ(lac-proAB) supE44 hsdR17 recA1 gyrA96 thi-1 endA1 relA1 e14- λ-
 性能(形質転換効率)
Value 108 HIT-JM109 :
 > 5×107cfu/μg pUC19 (平均 1×108cfu/μg pUC19)
 サブクローニングや通常のクローニングにお薦めです。

High 108 HIT-JM109 :
 > 1×108cfu/μg pUC19 (平均 5×108cfu/μg pUC19)
 高効率が要求されるクローニング、転写産物量の少ない遺伝子のクローニング、一般的なクローニング、遺伝子ライブラリー構築に適しています。
 包装
 (品番)    (品名) (内容)(税抜価格)
 RH717Value 108 HIT-JM10910本×100μl  16,000円
 RH717/3Value 108 HIT-JM109 ×330本×100μl  28,000円
 RH717-J80Value 108 HIT-JM109 J8080本×100μl  48,000円
 RH718High 108 HIT-JM10910本×100μl  24,000円
 RH718/3High 108 HIT-JM109 ×330本×100μl  48,000円
 RH718-J80High 108 HIT-JM109 J8080本×100μl  68,000円


  HIT-21


  タンパク発現もHIT™で!
 用途
HIT-21菌株は、世界中で最も普及しているタンパク質合成用大腸菌株です。lacUV5プロモーターの下流にT7 RNAポリメラーゼ遺伝子を組み込み、発現を厳密にコントロールしたIPTG誘導性菌株です。lon細胞内プロテアーゼ及び ompT細胞外プロテアーゼが欠損しているため、高いタンパク質合成量を確保することが可能です。本菌株は毒性タンパク質の合成には不向きですが、毒性のないタンパク質の合成においては、細胞の生存率や増殖性に優れています。
 遺伝子型
F- hsdS gal (λ cIts857 ind1 Sam7 nin5 lacUV5-T7 gene l)
 性能(形質転換効率)
Value 107 HIT-21 :
 > 5×106cfu/μg pUC19 (平均 1×107cfu/μg pUC19)
 包装
 (品番)    (品名) (内容)(税抜価格)
 RH217Value 107 HIT-21 5本×100μl  16,000円
 RH217-J40Value 108 HIT-21 J4040本×100μl  48,000円

HIT™コンピテントセルの用途別製品リスト  
用途 HIT-DH5aHIT-JM109HIT-21
サイズの大きいプラスミド
(>6Kb
 
サブクローニング  
cDNAライブラリー   
速い増殖   
一本鎖DNA   
ジーン・バンク  
変異誘発   
タンパク質発現 ××
Blue/white スクリーニング  
 (◎:最適 ○:適 ×:不適)
* 6kb以上の大きいプラスミドで高効率な形質転換を行う場合は、通常の1ステッププロトコールではなく改変プロトコール(Q&A集参照)をご使用ください。


HIT™コンピテントセルの遺伝子型リスト  
遺伝子型用途 HIT-DH5aHIT-JM109HIT-21
F- (80d lacZ M15) (lacZYA-argF)U169 hsdR17(r- m+) recA1 endA1 relA1 deoR F' traD36 proA+ proB+ lacIq (lacZ)M15I (lac-proAB) hsdR17 recA1 endA1 relA1 E.colo B, F-, dcm, ompT, hsdS(rB-mB-), gal (DE3)
endA1抽出中のプラスミドの分解を防ぐ ×
recA1DNAの組換えを防ぐ ×
hsd特定のPCR DNA鎖やcDNAライブラリーの形質転換効率を上げる
deoR高分子量のプラスミドやコスミドの形質転換効率を上げる ××
LacZ M15Blue/whiteスクリーニング
(IPTG添加)
×
lonlonプロテアーゼ欠損により、タンパク質の収量を上げる ××
ompTompTプロテアーゼ欠損により、タンパク質の収量を上げる ××
me131RNase Eを阻害し、mRNAの安定性を向上する ××


※ コンピテントセルは月曜・水曜出荷(翌日着)となります。ご了承下さい。
※ 表示価格はお客様から弊社へ直接ご注文いただいた場合の価格です。



 《お問合せ先》
  Email :   rbcscitrove.co.jp
  TEL   :   03-5842-1749
  FAX   :   03-5842-1926
 
 

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